Résonance magnétique nucléaire
Résonance Magnétique Nucléaire – Aspects conceptuels
Introduction à la spectroscopie RMN biomoléculaire à l’état solide - Robert Schneider (UGSF, Université de Lille)
Solid-state NMR spectroscopy has matured into a technology that can provide high-resolution insight into structure, dynamics and function of biological macromolecules. It is not, in principle, limited by molecular size; it can access insoluble molecules; and it does not require long-range order in the systems investigated. This allows to study, for example, membrane proteins embedded in actual lipid bilayers or large assemblies such as protein fibrils. Since there is no overall molecular tumbling in solid samples, anisotropic interactions are present which can considerably broaden spectral lines, but which can also be put to spectroscopic use. This lecture presents the fundamental observables and interactions characteristic of solid-state NMR measurements, in reference to the solution-state case, discusses recent methodological and technological advances, and illustrates applications to questions of biological interest.
Contributions de la RMN à la biologie structurale : Approches multi‐échelles spatiales et temporelles - Ewen Lescop (ICSN, Gif/Yvette)
Ce cours présentera les différentes manières par lesquelles la RMN donne accès aux aspects structuraux et dynamiques d'une protéine avec un regard particulier sur l'immense gamme de temps des mouvements couverte par cette technique. Nous reviendrons sur les bases d'une séquence d'impulsions RMN et les échelles de temps associées pour aborder des cinétiques lentes. Nous verrons ensuite comment un spectre RMN est sensible à la vitesse d'interconversion entre états. Nous verrons également comment la durée de vie de états renseigne sur la dynamique d'un système. Ces aspects théoriques seront agrémentés d'exemples concrets d'application de ces concepts sur des exemples issus des laboratoires.
Résonance Magnétique Nucléaire – Etat de l'art technologique
Instrumentations et derniers développements - Catherine Bougault (IBS, Grenoble)
Ce cours présentera les derniers développements apparus ces dernières années en RMN. Nous évoquerons les progrès instrumentaux et conceptuels et de préparation d'échantillons. Nous reviendrons également sur des exemples marquants d'apport de la RMN en biologie structurale ou biologie au sens large.
Résonance Magnétique Nucléaire – Aspects pratiques
TP : Etudes de cas en RMN en phase liquide et solide: Le spectre 15N HSQC est un outil unique pour la caractérisation rapide et simple de la structure/dynamique de biomacromolécules. Dans ce TP, nous analyserons une série de spectres 15N HSQC collectés sur des protéines diverses (structurée ou non, de taille diverse) dans l'objectif d'illustrer le contenu informationnel de ce type de spectres. Nous présenterons également comment ces spectres simples peuvent renseigner sur les interactions moléculaires ou les propriétés physico-chimiques (pKa,...) d'une protéine.
Une aide à la prise en main de CCPNMR
Journal Club RMN
Les articles qui serviront de base à ce Journal Club:
- Studying “Invisible” Excited Protein States in Slow Exchange with a Major State Conformation
- Solution structure of aminor and transiently formed state of a T4 lysozyme mutant
- Large-Scale Conformational Dynamics Control H5N1 Influenza Polymerase PB2 Binding to Importin α